Qualitative Analyse auf HIV. DNA-Tests auf HIV für Erwachsene und Kinder: Das Wesentliche der Studie, Anwendungsbereich. PCR-Analyse auf HIV – wann, warum und in welchem ​​Zeitraum

Einer der meisten ernsthafte Krankheit, die noch nicht geheilt ist, wird durch das Humane Immundefizienzvirus verursacht.

Den Erreger im Körper nachzuweisen, ist nicht einfach: Derzeit werden hierfür nur wenige Forschungsmethoden eingesetzt.

Ein solcher Test ist Polymerase-Kettenreaktion (PCR).

Um die Methode der Polymerase-Kettenreaktion zu verstehen, müssen Sie sich die Strukturmerkmale von Zellen aus der Schule merken.

Beliebig lebende Zelle enthält Protein und zwei Arten von Nukleinsäuren: DNA und RNA. Sie sind die wichtigsten Zellstrukturen, weil sie enthalten genetische Information, auf besondere Weise kodiert.

Der DNA-Code ist eine strenge Abfolge von Mikrostrukturen, die eine lange Kette bilden.

Referenz! Die Grundlage der PCR ist die Fähigkeit von Nukleinsäuren, sich unabhängig zu vermehren.

Wenn das Virus in gesunde Zellen eindringt, zerstört es DNA-Stränge.

In diesem Fall enthält die Zelle keine vollständigen Ketten mehr, sondern nur noch kleine Fragmente – Nukleotide. Darüber hinaus werden selbst kleinste Partikel des Virus sichtbar.

Auf dem Nachweis beschädigter DNA-Stränge und Zellreste basiert die Methode der Polymerase-Kettenreaktion.

Es gibt zwei Arten der PCR-Diagnostik:

  • Gute Qualität. Geeignet für diejenigen, deren Diagnose nicht bestätigt wurde: Es zeigt lediglich an, ob das Virus in den Zellen vorhanden ist.
  • Quantitativ. Der Patient erhält das Ergebnis „Keine virale DNA nachgewiesen“, was bedeutet, dass kein HIV vorhanden ist, oder eine Information über das Vorhandensein des Erregers, was bedeutet, dass die Person mit HIV infiziert ist.

Liegt eine gesicherte Diagnose vor, ist eine quantitative Analyse vorgeschrieben. Es wird verwendet, um die Anzahl der Kopien der RNA (DNA) des Virus im Blut (in den Zellen) zu bestimmen. Die quantitative Analyse ermöglicht es uns, die Wirksamkeit der Behandlung bei HIV-infizierten Menschen zu bewerten, den Schweregrad der Erkrankung und ihren Verlauf zu bestimmen.

Welche Diagnosemethoden eine HIV-Infektion erkennen können, wird im Video beschrieben:

Vor- und Nachteile dieser Diagnosemethode

Wie jede diagnostische Maßnahme hat auch die PCR ihre Vor- und Nachteile.

Zu den Vorteilen der Methode gehören:

  • Hohe Zuverlässigkeit. Mit der PCR ist es möglich, kleinste Virusreste nachzuweisen; die Wahrscheinlichkeit, den Erreger nachzuweisen, liegt 4-5 Tage nach der Infektion bei 80 %, 14 Tage nach der Infektion bei 100 %. Somit wird die größte Genauigkeit bei der Untersuchung der DNA des Virus in Blutzellen erreicht: Das Virus kann nachgewiesen werden, wenn seine Anzahl 1-5 Kopien pro 1 Million Zellen beträgt.
  • Möglichkeit zur Verwendung verschiedener Biomaterialien(Speichel, Urin, Schweiß und Tränen sind für die PCR nicht geeignet, es können jedoch Blut, Sperma und Genitalsekrete von Frauen verwendet werden).
  • Möglichkeit der Analyse auf verschiedene Krankheiten anhand einer Probe. Mithilfe der PCR können Sie HIV, Chlamydien, Herpes, Zytomegalievirus, Ureaplasma, Mykoplasmen, Gonorrhoe, Trichomoniasis und Toxoplasmose nachweisen.
  • Schnelle Ergebniserzielung. Es gibt einen PCR-Schnelltest, mit dem Sie innerhalb weniger Stunden die Diagnoseergebnisse erfahren können.
  • Hohe Empfindlichkeit: PCR hilft, anders als beispielsweise ELISA, den Virusnachweis in den ersten Wochen nach der Infektion.
  • Möglichkeit, Ergebnisse innerhalb weniger Tage nach der Infektion zu erhalten. Bei einer Infektion kann das Virus nach 5–14 Tagen nachgewiesen werden, während der ELISA-Test erst nach 6 Wochen durchgeführt werden sollte.
  • Keine Altersbeschränkung. Die PCR kann sowohl bei Erwachsenen als auch bei Kindern ab der Geburt durchgeführt werden.

Das Hauptmerkmal der PCR-Analyse besteht darin, dass sie keine Antikörper gegen das Virus, sondern das Virus selbst nachweist.

Den Vorteilen stehen nur wenige Nachteile gegenüber:

  • Teuer.
  • Die Wahrscheinlichkeit, falsch positive Ergebnisse zu erhalten, liegt bei etwa 20 %. Dies geschieht in der Regel aufgrund eines Verschuldens des Personals (Fehler bei der Sammlung oder dem Transport von Biomaterial, bei der Untersuchung von Biomaterial und der Entschlüsselung der Ergebnisse).
  • Die Notwendigkeit, fortschrittliche High-Tech-Geräte zu verwenden, mit denen nur einige Kliniken ausgestattet sind.

Aufmerksamkeit! Offensichtlich hat die Methode weit mehr Vorteile als Nachteile. Besonders wichtig ist, dass es mithilfe der PCR möglich ist, die Krankheit im Anfangsstadium der Entwicklung zu erkennen und rechtzeitig mit der Behandlung zu beginnen.

Das Ergebnis eines PCR-Tests kann bereits 14-21 Tage nach einer möglichen Infektion positiv sein. Wenn der Test jedoch negativ ausfällt, ist dies keine Garantie dafür, dass keine Infektion vorliegt. Es ist besser, nach 2 Wochen einen bestätigenden Honig-ELISA-Test durchzuführen.

Wie der PCR-Test auf HIV durchgeführt wird, erfahren Sie im Video:

Wem ist es zugeordnet?

Bei Verdacht auf HIV wird zunächst eine PCR verordnet. Die Technik kann auch zur Identifizierung sexuell übertragbarer Krankheiten und Erbkrankheiten hilfreich sein.

Referenz! Die PCR-Diagnostik wird oft auf Initiative einer Person durchgeführt, die keine Krankheitssymptome zeigt, bei der jedoch die Vermutung und Besorgnis über eine mögliche Ansteckung besteht, beispielsweise nach ungeschütztem Geschlechtsverkehr, einer kürzlich erfolgten Bluttransfusion oder Kontakt mit einem Infizierten Person.

Wer ist sonst noch für die Prüfung vorgesehen?

  • Personen, deren ELISA-Test zweimal positiv war. Mithilfe der PCR kann eine definitive Diagnose gestellt werden.
  • Spender planen eine Blutspende.
  • Personen, bei denen Immunblotting die Diagnose bestätigte. Immunblotting ist eine Methode zur Diagnose von AIDS und wird normalerweise in Verbindung mit PCR durchgeführt.
  • Menschen, die wegen einer durch HIV verursachten Krankheit behandelt werden. Mit der PCR können Sie die Wirksamkeit der Therapie beurteilen.
  • Neugeborene, deren Mutter HIV-positiv ist (eine Übertragung des Virus erfolgt in etwa 30 % der Fälle). Bereits 2-3 Wochen nach der Geburt lässt sich feststellen, ob eine Infektion vorliegt.

Manche Menschen werden zu präventiven Zwecken getestet, dies geschieht jedoch nicht oft, da die Kosten für PCR-Tests hoch sind.

Wie lange dauert die Analyse und wo kann ich sie durchführen lassen?

Die HIV-PCR-Analyse wird in einer Laborumgebung durchgeführt.

Die Blutabnahme selbst dauert 5-10 Minuten und die Ergebnisse liegen am nächsten Tag vor.

Bei der Wahl der Expressdiagnostik (z. B. im Invitro- oder Hemotest-Labor) dauert die Interpretation der Ergebnisse durch einen Spezialisten nur 2 Stunden.

In Privatkliniken kann die Diagnostik auf Wunsch auch anonym erfolgen. Dazu müssen Sie dies bei einem persönlichen Besuch mitteilen: Jedem Patienten wird eine Seriennummer zugewiesen und er erhält Zugang zu einem persönlichen Konto. Dann kann eine Person die Ergebnisse auch ohne einen zweiten Besuch im Labor erfahren.

Die Zuverlässigkeit der PCR-Testergebnisse wird im Video beschrieben:

Kosten der Studie

PCR-Diagnostik ist nicht billig, da sie eine bestimmte fortschrittliche Ausrüstung sowie spezielle Kenntnisse eines Spezialisten erfordert.

Die Ausrüstung ist nur in einigen medizinischen Labors verfügbar, wodurch die Analyse teuer sein kann.

Die durchschnittlichen Forschungskosten betragen 3000-5000 Rubel. In einigen Regionen übersteigen die Kosten 1500-2000 Rubel nicht.

Da die Möglichkeit falsch positiver und falsch negativer Ergebnisse besteht oder die Anfrage zu früh gestellt wurde (das Virus hat die DNA-Struktur noch nicht beschädigt, ist aber bereits im Körper vorhanden), kann eine Wiederholung des Tests erforderlich sein.

Der hohe Aufwand ist auch darauf zurückzuführen, dass die Diagnose eine Reihe von Komponenten erfordert:

  1. Ein DNA-Segment (Vorlage), das zur Amplifikation bestimmt ist;
  2. Zwei Primer;
  3. Polymerase ist eine chemisch aktive Komponente, die den Anstieg der Anzahl viraler Partikel exponentiell beschleunigt;
  4. Desoxyribonukleosidtriphosphate;
  5. Geladene Teilchen aus zweiwertigem Magnesium;
  6. Eine spezielle Lösung, in der der Polymerisationsprozess durchgeführt wird. Diese Lösung ist darauf ausgelegt, einen geeigneten Säuregehalt, eine angemessene Salzkonzentration und einen angemessenen Magnesiumgehalt in der Flüssigkeit aufrechtzuerhalten.

Außerdem erfordert die Studie eine kleine Menge Vaseline: Sie enthält Fette und siedet bei hohen Temperaturen, was die zu untersuchende Probe vor Überhitzung schützt.

Analyse durchführen

Zur Analyse eignen sich Blut, Sperma und Vaginalausfluss. Allgemein, Venöses Blut wird häufiger verwendet.

Die Blutentnahme erfolgt morgens auf nüchternen Magen.

Darüber hinaus müssen Sie sich auf die Analyse vorbereiten:

  • 2-3 Tage vor der Diagnose sollten fetthaltige Lebensmittel aus der Ernährung ausgeschlossen werden.
  • Alkohol ist 1-2 Tage vor der Analyse ausgeschlossen.
  • 2 Wochen vor dem Test müssen Sie die Einnahme immunstimulierender Medikamente abbrechen.
  • Die letzte Mahlzeit sollte spätestens 8 Stunden vor der Blutspende eingenommen werden.

Bei der Blutentnahme aus einer Vene wird die innere Ellenbogenbeuge mit einer speziellen Lösung behandelt, anschließend durchsticht der Spezialist die Haut, platziert eine Venenspritzennadel und entnimmt die erforderliche Menge Blut. Dann wird die Nadel entfernt, die Stelle erneut mit Alkohol behandelt und dem Patienten ein Wattestäbchen gegeben.

Der Patient muss vorübergehend seinen Arm beugen, um die Blutung zu stoppen. Wenn es einem Menschen gut geht, kann er sofort nach Hause gehen. Bei Schwindel, Übelkeit und Ohnmacht wird Erste Hilfe geleistet.

Der Labortechniker gibt das resultierende Biomaterial in einen sterilen Kolben und schickt es zur Diagnostik. Der Spezialist vermischt das gespaltene biologische Material in einem speziellen Reaktor mit Enzymen, die verschiedene Infektionen synthetisieren.

Befinden sich nur sehr wenige Viruspartikel im Blut, steigt deren Zahl bei der Interaktion mit Enzymen stark an: Die Reagenzien verbinden sich mit der DNA des Virus und vervielfältigen diese.

Die Analyse erfolgt in mehreren Schritten, da die Teilung der Moleküle im geometrischen Verlauf erfolgt. Eine Zelle ergibt 2, 2 ergibt 4 und so weiter.

Wenn wir die Meinungen und Bewertungen von Ärzten analysieren, können wir mit Sicherheit sagen: Derzeit ist die PCR-Diagnostik die genaueste Methode zum Testen auf eine HIV-Infektion.

Referenz! Mithilfe der Analyse ist es möglich, innerhalb weniger Tage nach der Infektion das Vorhandensein des Virus im Körper festzustellen, auch wenn die Anzahl der Virusstrukturen nur 1-5 Einheiten pro Million Zellen beträgt. Wir sollten jedoch die Nachteile der Methode nicht vergessen, beispielsweise die Wahrscheinlichkeit falsch positiver Ergebnisse.

Allerdings bleibt die PCR einer der wenigen Tests, der eine rechtzeitige Diagnose der Erkrankung und den Beginn einer Behandlung ermöglicht.

Für die meisten Frauen und Männer ist diese sexuell übertragbare Krankheit von größter Bedeutung. Aus diesem Grund verspürt ein vernünftiger Mensch nach einer ungezwungenen intimen Beziehung ohne Barriereverhütung sowie bei häufigen Wechseln der Sexualpartner und nach chirurgischen Eingriffen eine gewisse Vorsicht. Die zuverlässigste Abklärung ist ein Gang in die Klinik und ein PCR-Test auf HIV.

Mit einer Blutuntersuchung können folgende Indikatoren ermittelt werden:

  • Widerlegung/Bestätigung des Vorliegens von HIV während der Latenzzeit (in den ersten Wochen nach der Infektion werden Antikörper aufgrund ihrer Abwesenheit oder zu geringen Konzentration im ELISA-Test nicht nachgewiesen).
  • Bestimmung des Genotyps von HIV-1, HIV-2.
  • Feststellung des Status von Kindern, die von Trägermüttern geboren wurden (Antikörper gegen HIV). lange Zeit werden bei allen Kindern von HIV-infizierten Frauen nachgewiesen. Die Bestimmung der DNA des Virus bei Kindern erfolgt vorzugsweise im Alter von bis zu 48 Lebensstunden, 1-2 Monaten, 3-6 Monaten.
  • Falsch negative, falsch positive und fragwürdige Ergebnisse von ELISA-Tests.
  • Diagnose der HIV-Menge und Überwachung der Veränderungen der Viruslast im Zeitverlauf (bei einer bereits gesicherten AIDS-Diagnose dient die PCR-Analyse zur Prognose, dynamischen Beobachtung und Therapieüberwachung).

Preis für PCR-Test auf HIV

Methoden Art der PCR-Analyse Preis
HIV-Typ-1-DNA qualitativ 2 750
HIV-Typ-1-RNA im Plasma quantitativ 8 850
HIV-RNA, Bestimmung der HIV-Resistenz gegen Protease- und Reverse-Transkriptase-Inhibitoren (zusammen mit „HIV-RNA im Plasma“ bestellt) - 16 550
HIV-RNA, Bestimmung der HIV-Resistenz gegen Integrase-Inhibitoren (zusammen mit „HIV-RNA im Plasma“ bestellt) - 16 950
HIV-1-RNA/DNA, Bestimmung des HIV-Tropismus - 16 950
Multiprime-Forschung
Hepatitis-C-RNA + Hepatitis-B-DNA + HIV-RNA Typ 1 und 2 (ultrasensitive Methode) qualitativ 3 800

PCR-Analyse auf HIV – wann wird sie durchgeführt, warum und in welcher Zeit?

  1. HIV-DNA. Die DNA-Diagnostik des humanen Immundefizienzvirus kann zur Früherkennung einer möglichen Infektion nach einem Hochrisikofall eingesetzt werden (Blutuntersuchungen werden ab 10 Tagen nach einer möglichen Infektion durchgeführt). Um eine Infektion vollständig auszuschließen, ist jedoch eine anschließende Wiederholungsstudie und ELISA-Diagnostik innerhalb von 4 und 12 Wochen erforderlich.
    Testergebnisse: HIV-DNA ( qualitative Analyse) - „nicht erkannt“ oder „erkannt“. Im letzteren Fall sind wiederholte zusätzliche Studien erforderlich, um eine HIV-Infektion zu bestätigen. Bei negativem Ergebnis, aber hohem Infektionsrisiko ist eine erneute Untersuchung erforderlich – Blutspende mittels PCR- oder ELISA-Methode nach einiger Zeit.
  2. HIV-RNA. Die Bestimmung der HIV-RNA mittels quantitativer PCR (der sogenannten „Viruslast“) ist einer der Indikatoren zur Beurteilung der Prognose des Verlaufs einer HIV-Infektion und der früheste Indikator für die Wirksamkeit einer antiviralen Therapie. Der Test dient dazu, den Krankheitsverlauf zu überwachen, über den Beginn einer Therapie zu entscheiden und deren Wirksamkeit zu beurteilen.
    HIV-RNA-Tests mittels PCR können bei Erwachsenen zur frühzeitigen und zuverlässigen Diagnose einer möglichen Infektion nach einer Hochrisikoepisode (ca. 7–10 Tage nach der wahrscheinlichen Infektion) eingesetzt werden. Das Vorhandensein eines hohen HIV-RNA-Titers in Abwesenheit von Antikörpern ermöglicht die Diagnose einer akuten HIV-Infektion. Zur Klärung der Diagnose ist jedoch eine erneute Untersuchung und ELISA-Diagnostik innerhalb von 1 und 3 Monaten erforderlich.
    HIV-RNA-PCR-Test bei schwangeren Frauen mit dieser Infektion 3-4 Wochen vor dem erwarteten Geburtstermin, um über die Art der Entbindung (vaginaler oder Kaiserschnitt) zu entscheiden.
    Analyseergebnisse: HIV-RNA HIV Typ 1 (quantitative Analyse)- „nicht erkannt“ (das ist normal).
  3. HIV-Resistenz. Eine Analyse zur Bestimmung der Resistenz von HIV gegen Protease- und Reverse-Transkriptase-Inhibitoren ist bei HIV-Infizierten mit ineffektiver Therapie sowie während der akuten Infektionsphase vor Beginn einer antiviralen Behandlung angezeigt. Die Studie ermöglicht es uns, die Resistenz von HIV gegen Medikamente zu bestimmen. Basierend auf den Ergebnissen der Analyse erfährt der Spezialist für Infektionskrankheiten das Vorhandensein von Resistenzmutationen gegen Proteaseinhibitoren, Nukleosid- und Nicht-Nukleosid-Reverse-Transkriptase-Inhibitoren sowie Informationen zu jeder Aminosäureposition, die mit einer Arzneimittelresistenzmutation verbunden ist.
  4. Multiprime umfassende Diagnostik: qualitative Bestimmung von Hepatitis-C-Virus-RNA / Hepatitis-B-Virus-DNA / humanem Immundefizienzvirus (HIV)-RNA Typ 1 und 2 (ultrasensitive Methode). Die Analyse ermöglicht die Diagnose einer HIV-Infektion, Virushepatitis C und B frühe Stufen. Die Studie dient der Früherkennung von Virushepatitis B und C, HIV Typ 1/2, bei Risikopersonen. Der Nachweis von DNA- oder RNA-Viren weist auf eine Infektion hin.

Die Bearbeitungszeit für Bluttestdaten beträgt 3 bis 7 Kalendertage. Bestehen Sie qualitative und quantitative PCR-Tests zur Diagnostik HIV infektion In Moskau können Sie in unserem medizinischen Zentrum. Blutentnahme täglich von 10:00 Uhr, auch um 17:00 Uhr

Beschreibung

Die Polymerase-Kettenreaktion (PCR) wurde 1983 vom amerikanischen Biochemiker Carey B. Mullis erfunden. Für diese Entdeckung erhielt er 1993 den Nobelpreis.

Heutzutage sind die Anwendungsgebiete der PCR: moderne Methode Molekularbiologie extrem breit. Die PCR-Diagnostik nimmt in der medizinischen Praxis einen besonderen Stellenwert ein. Und der Grund dafür ist ganz einfach: Die Polymerase-Kettenreaktion macht das Unmögliche möglich.

PCR-Diagnostik wird oft bildlich als eine Methode beschrieben, mit der man eine Nadel im Heuhaufen findet und dann aus diesen Nadeln einen Heuhaufen baut. Die „Nadel“ ist ein winziges Stück des genetischen Materials einer Zelle (DNA oder RNA).

Damit ist die Entdeckung dieser Methode eines der bemerkenswertesten Ereignisse auf dem Gebiet der Molekularbiologie der letzten Jahrzehnte. Durch die Entwicklung der PCR-Methode konnte die medizinische Diagnostik insgesamt auf ein qualitativ neues Niveau gehoben werden.

PCR-Grundlagen

Grundlage der Methode ist das wiederholte selektive Kopieren (Amplifizieren) eines bestimmten DNA-Abschnitts, um so viel genetisches Material zu erhalten, dass es für den visuellen Nachweis ausreicht. In diesem Fall wird nur ein bestimmter DNA-Abschnitt mehrfach kopiert (amplifiziert), sofern er im untersuchten Biomaterial vorhanden ist.

Darüber hinaus ermöglicht die Forschung neben der einfachen Erhöhung der Kopienzahl von DNA-Abschnitten auch andere Manipulationen mit genetischem Material. Daher wird die Methode häufig verwendet wissenschaftliche Forschung, biologische und medizinische Praxis: bei der Diagnose von Infektions- und Erbkrankheiten, bei der Identifizierung von Mutationen, der Genotypisierung, der Feststellung der Vaterschaft, der Personenidentifikation usw.

PCR in der Diagnose von Infektionskrankheiten

Die PCR-Diagnostik von Infektionen gehört heute zu den genauesten, empfindlichsten und effektivsten klinischen Labormethoden. Darüber hinaus ist die Bandbreite der nachgewiesenen Erreger praktisch unbegrenzt – es soll ein Testsystem zur PCR-Analyse des gesuchten Erregers entwickelt werden.

Aufgrund ihrer hohen Empfindlichkeit können Sie mit der PCR den Erreger auch bei minimalem Gehalt identifizieren (d. h. nur wenige Moleküle seiner DNA sind im untersuchten Biomaterial vorhanden).

PCR identifiziert Krankheitserreger Infektionskrankheiten wenn dies mit anderen Methoden (immunologisch, kulturell, mikroskopisch) nicht möglich ist. Daher ist die Polymerase-Kettenreaktionsmethode für eine Reihe von Infektionserregern zum „Goldstandard“ geworden; sie ist bewährt und klinisch getestet. In der modernen Labordiagnostik von Infektionskrankheiten ist die PCR die empfindlichste und spezifischste Methode zum direkten Nachweis von Krankheitserregern. Dies ermöglicht nicht nur die Feststellung der Ätiologie der Krankheit, sondern auch die Überwachung des Verlaufs des Infektionsprozesses und die Beurteilung der Wirksamkeit der Behandlung.

Die Analyse auf STIs mittels der PCR-Methode ist besonders relevant im asymptomatischen Verlauf des Infektionsprozesses, der durch unbedingt pathogene Mikroorganismen verursacht wird ( Chlamydien, qualitative DNA-Bestimmung ; Mykoplasmen, qualitative DNA-Bestimmung ; Gonorrhoe-Erreger, qualitative DNA-Bestimmung ; Erreger der Trichomoniasis, qualitative Bestimmung der DNA). Beispielsweise ist es bei chronischer Gonorrhoe bei Frauen selbst mit der bakteriologischen Methode oft nicht möglich, Gonokokken zu identifizieren, obwohl Symptome eines chronischen Entzündungsprozesses im Gebärmutterhals oder in der Harnröhre vorliegen.

Die moderne PCR-Diagnostik ermöglicht nicht nur die Identifizierung des genetischen Materials von Infektionserregern, sondern auch die Bestimmung ihrer DNA-/RNA-Konzentrationen (quantitatives Forschungsformat). Die Bestimmung der Anzahl der Krankheitserreger ist wichtig für die Entscheidung über die Behandlung, insbesondere wenn opportunistische Krankheitserreger identifiziert werden ( Mykoplasmen, DNA-Quantifizierung ; Ureaplasma-Typisierung, DNA-Quantifizierung) .

Eine der Hauptrichtungen bei der Entwicklung der PCR-Methode ist das am CMD entwickelte „Multiprime“-Format, das den Nachweis mehrerer Krankheitserreger in einem Reagenzglas (und einer Reaktion) ermöglicht.

PCR-Diagnostik von Hepatitis

Derzeit sind mindestens 5 Viren bekannt, deren Fähigkeit, Leberschäden zu verursachen, nachgewiesen ist. Dies sind die Erreger der Hepatitis A, B, C, D, E. In seltenen Fällen kann Hepatitis durch Epstein-Barr- und Herpes-simplex-Viren verursacht werden. Die Fähigkeit von Erregern wie TT- und Hepatitis-G-Viren, die Leber zu infizieren, wird heute nicht von allen erkannt. Alle diese Viren gehören zu unterschiedlichen Familien, haben unterschiedliche biologische Eigenschaften und dementsprechend unterscheiden sich auch die Behandlungstaktiken je nach Ätiologie der Hepatitis erheblich.

Vor diesem Hintergrund ist die adäquate ätiologische Diagnose einer Virushepatitis mit der Identifizierung eines spezifischen Erregers ein sehr drängendes Problem. Ohne den Einsatz moderner molekularbiologischer Methoden ist dies nicht möglich. Daher ist die Diagnose einer Hepatitis mithilfe der Polymerase-Kettenreaktionsmethode einer der wichtigsten Schritte zur Feststellung der Krankheitsursache und zur Festlegung weiterer Behandlungstaktiken.

PCR in der Diagnose einer HIV-Infektion

Derzeit wird für die Labordiagnose einer HIV-Infektion der zugänglichste und gleichzeitig empfindlichste Ansatz verwendet – der Nachweis von Antikörpern gegen HIV mittels Enzymimmunoassay (ELISA)– gefolgt von der Bestätigung positiver Ergebnisse der Analyse durch Immunblotting (IB). Die Effizienz der Identifizierung von HIV-infizierten Personen kann mit diesem Ansatz 99 % oder mehr erreichen.

Die serologische Diagnose einer HIV-Infektion weist jedoch eine Reihe von Einschränkungen auf:

  1. Ineffizienz während der sogenannten Periode „serologisches Fenster“ (in den ersten Wochen nach der Infektion werden Antikörper aufgrund ihrer Abwesenheit oder geringen Konzentration nicht nachgewiesen).
  2. Antikörper gegen HIV wurden schon lange bei allen Kindern HIV-infizierter Mütter nachgewiesen.
  3. Falsch positive ELISA-Ergebnisse aufgrund des Vorhandenseins von Antikörpern gegen Antigene, die HIV-Antigenen ähneln, im Blut.
  4. Falsch negative und fragwürdige Ergebnisse von ELISA und Immunblotting (insbesondere bei Patienten im Endstadium der Erkrankung).

Daher werden mittlerweile zunehmend PCR-Tests zum Screening auf eine HIV-Infektion eingesetzt. Gemäß den „Methodischen Empfehlungen zum Testen auf HIV-Infektion“ (genehmigt vom Ministerium für Gesundheit und soziale Entwicklung der Russischen Föderation am 08.06.2007) „wenn epidemiologische Kriterien vorliegen, die auf ein aktuelles Risiko einer HIV-Infektion für Patienten hinweisen und bei gleichzeitig vermutlich falsch-positive oder falsch-negative Ergebnisse im ELISA und IB, z. B. Bei der Untersuchung von Kindern von HIV-infizierten Müttern oder Patienten im „seronegativen Fenster“ kommt die PCR-Methode zum Einsatz, die das HIV nachweist Genmaterial ...“ Und im Falle einer bereits gesicherten Diagnose einer HIV-Infektion dient die PCR-Analyse der Prognose, dynamischen Beobachtung und Therapieüberwachung.

Im Zentrum für Molekulare Diagnostik (CMD) können Sie anonym einen PCR-Test auf HIV durchführen lassen.

Eine gefährliche Krankheit, die zu Recht als „Pest des 21. Jahrhunderts“ bezeichnet wird. Deshalb werden enorme Mengen an Geld und Ressourcen für den Kampf gegen diese Krankheit sowie für ihre Erforschung aufgewendet. Tatsache ist, dass das Immundefizienzvirus noch nicht vollständig untersucht wurde. Neue Entdeckungen ermöglichen es Wissenschaftlern, Impfstoffe zu entwickeln und Medikamente um gegen ihn zu kämpfen. In der modernen Medizin wird den Methoden zur Diagnose dieser Krankheit große Aufmerksamkeit geschenkt. Einer der meisten effektive WegeÄrzte auf der ganzen Welt erkennen die PCR zum Nachweis des Virus an. Bei HIV wird diese Methode durch DNA-Tests durchgeführt. Was ist diese Studie, wie zuverlässig ist sie und wie bereitet man sich auf die Analyse vor?

Was ist ein HIV-Test – PCR?

Zunächst sollten Sie diese Abkürzung entschlüsseln. Die Polymerase-Kettenreaktion (PCR-Methode für HIV) ist ein Diagnostikum, das in unserem Land in der freien Medizin noch nicht weit verbreitet ist. Dafür gibt es mehrere Gründe. Aber die Hauptsache ist, dass solche Forschung nicht billig ist. Darüber hinaus liegt seine Wirksamkeit bei etwa achtzig Prozent, wenn der enzymgebundene Immunosorbens-Assay und das Immunoblot eine höhere Zuverlässigkeit aufweisen. Sie liegt zwischen fünfundneunzig und achtundneunzig Prozent. Natürlich kann HIV mittels PCR nachgewiesen werden. Es wird auch für andere Zwecke verwendet. Mithilfe von DNA- und RNA-Untersuchungen werden genetische und erbliche Erkrankungen sowie Infektions- und Viruserkrankungen ermittelt.

Was ist PCR für HIV, deren Zuverlässigkeit, wie oben erwähnt, nur achtzig Prozent beträgt, und warum hat diese Diagnosemethode einen solchen Namen erhalten? Für diese Art von Forschung werden verschiedene Arten von biologischem Material verwendet. Beim Immundefizienzvirus handelt es sich hierbei in erster Linie um Blut. Außerdem werden Genitalsekrete für einen HIV-Test mittels PCR-Methode verwendet. weibliche Organe und Sperma. In diesem Fall wird der Speichel nicht untersucht. Weil es unwirksam ist. Speichel enthält eine kleine Anzahl Viruszellen. Dasselbe gilt auch für Urin, Schweiß und Tränenflüssigkeit.

Erkennt die HIV-PCR ein Antigen oder nicht? Diese Frage wird Medizinern oft gestellt. Die Antwort kann nicht positiv sein. Weil das diese Methode Die Diagnostik zielt auf die Untersuchung von DNA und RNA ab. Die qualitative PCR für HIV wird in einer bestimmten Reihenfolge durchgeführt. Bei der mutmaßlich infizierten Person wird das notwendige biologische Material gesammelt. Am häufigsten wird für eine solche Studie venöses Blut entnommen. Übrigens wird dem Patienten nicht empfohlen, vorher mehrere Tage lang fetthaltige Lebensmittel zu sich zu nehmen. Die Studie wird auf nüchternen Magen durchgeführt. Das biologische Material wird in einen speziellen Laborreaktor gegeben und dort zersetzt. Anschließend werden dem biologischen Material bestimmte Enzyme zugesetzt (sie sind für jede Krankheit oder Pathologie unterschiedlich). Um eine Kopie einer Mikrobe, eines Virus oder einer Infektion zu synthetisieren, binden diese Enzyme an deren DNA.

Dies geschieht in mehreren Stufen nach dem Prinzip einer Kettenreaktion. Erstens werden aus einem Molekül Desoxyribonukleinsäure zwei, also vier usw., gewonnen. Nach Abschluss mehrerer Forschungszyklen erhält der Labortechniker Hunderte oder Tausende Kopien der DNA des untersuchten Materials, dank derer er diese problemlos mit der DNA aller pathogenen Organismen, Infektionen und Pathologien auf genetischer Ebene vergleichen kann. einschließlich des Immundefizienzvirus. Dank dieser Studie können Patienten einen PCR-Test machen HIV zuerst oder der zweite Typ. Es kann auch verwendet werden, um die Konzentration von Viruszellen im menschlichen Blut zu bestimmen. Wenn der PCR-Test auf HIV positiv ausfällt, ihm jedoch kein Immunblotting oder ELISA-Screening vorangegangen ist, wird der Patient zu solchen Untersuchungen überwiesen. Wenn der Polymerase-Kettenreaktion eine der oben genannten Arten von Forschung vorausging, besteht für Mediziner kein Zweifel. In diesem Fall wird der Person eine konkrete Diagnose gestellt. Wenn der PCR-Test auf HIV negativ ausfällt, die Ärzte aber weiterhin Zweifel haben, kann der Patient auch zu weiteren Tests überwiesen werden. Es ist zu beachten, dass bei dieser Diagnosemethode ein falsch positives Ergebnis häufiger festgestellt wird als ein falsch negatives. Es ist wichtig zu wissen, dass der PCR-Test auf HIV nicht mit der Abstrich- oder Schabemethode durchgeführt wird.

Wo kann ich einen PCR-Bluttest auf HIV durchführen lassen und kann dieser kostenlos durchgeführt werden?

Wie oben erwähnt, ist die Studie dieser Art in Russland nicht sehr verbreitet. Und der Grund dafür sind die hohen Kosten. Dies lässt den Schluss zu, dass es unmöglich ist, in einer regulären öffentlichen Klinik einen PCR-Test auf HIV durchzuführen (die Zuverlässigkeit des PCR für HIV Typ 2 und Typ 1 ist gleich). Dazu müssen Sie sich an ein spezialisiertes Labor oder eine kostenpflichtige Klinik wenden. In Großstädten gibt es spezialisierte AIDS-Zentren, in denen PCR-Tests kommerziell durchgeführt werden. IN besiedelte Gebiete Nicht jeder hat die Möglichkeit, sich dieser Art von Forschung zu unterziehen, aber Bewohner solcher Orte können jederzeit Großstädte besuchen, um auf ihre eigene Gesundheit zu achten.

Wie schnell sollte ich nach einem Infektionsverdacht einen PCR-Test auf HIV machen?

Mediziner werden oft gefragt, wie lange es dauert, einen PCR-Test auf HIV durchzuführen. In diesem Fall gibt es keinen Unterschied zwischen den Studien. Sowohl Polymerase-Kettenreaktions- als auch ELISA-Immunblotting-Tests sollten frühestens drei bis vier Wochen nach dem Verdacht auf eine Infektion durchgeführt werden. Es macht keinen Sinn, vor diesem Zeitraum Forschung zu betreiben. Mit der PCR lässt sich HIV nach 10 Tagen nicht mehr nachweisen.

In einigen Fällen kann die Infektion früher oder später als im angegebenen Zeitraum erkannt werden. Dies hängt jedoch von den spezifischen Eigenschaften des untersuchten Organismus ab. Es ist wichtig zu wissen, dass die Polymerase-Kettenreaktion nicht nur infizierte Personen, sondern auch Träger des Virus erkennen kann. Der Zeitpunkt der HIV-PCR hängt weitgehend vom Labor ab, in dem die Diagnose gestellt wird. Im Durchschnitt dauern sie nicht länger als einen Tag. Es gibt aber auch einen Expresstest, der bei Bluttransfusionen oder in der Notfallmedizin notwendig ist.

Die Rolle der PCR-Diagnostik der HIV-Infektion in der Neonatologie

Der HIV-PCR-Test wird in der Neonatologie eingesetzt, wenn infizierte Frauen Kinder zur Welt bringen. Jeder weiß, dass in diesem Fall das Risiko einer Übertragung des Virus von der Mutter auf das Kind extrem hoch ist. Alle Neugeborenen, deren Mütter infiziert sind oder Träger des Immundefizienzvirus sind, haben zum Zeitpunkt der Geburt bereits Antikörper gegen das Immundefizienzvirus im Blut, unabhängig davon, ob eine Infektion stattgefunden hat oder nicht. Mithilfe der PCR-Diagnostik bei HIV kann festgestellt werden, ob es sich um einen sogenannten Schutz handelt Immunsystem oder als Folge einer Infektion. Diese Art von Forschung wird in den ersten Lebenstagen von Säuglingen nicht durchgeführt. Denn wenn es während der Geburt zu einer Infektion über den Geburtskanal kommt, kann die Krankheit durch die sofortige Analyse nicht erkannt werden. Er wird es nur zeigen, wenn die Infektion intrauterin war. Die Genauigkeit der HIV-PCR bei Neugeborenen liegt ebenfalls bei etwa achtzig Prozent.