Ifa 4 generacije u 6 tjedana. „Razdoblje prozora“ ili kada je ELISA test na HIV potpuno pouzdan? Podtipovi identificirani ELISA testom i njihova distribucija

Kod većine bolesnika antitijela na HIV otkrivaju se 6-12 tjedana nakon infekcije test sustavima prve generacije i 3-4 tjedna test sustavima treće generacije koji rade na principu sendvič ELISA testa s dva antigena. Međutim, infekcija HIV-om otkriva se već 2 tjedna nakon infekcije analizom na antigen p24, a nakon 1 tjedna analizom na virusnu RNK. Drugim riječima, razdoblje prozora može se smanjiti na 2 tjedna ili više uz sveobuhvatan dijagnostički pristup. Kapsidni antigen p24 pojavljuje se u krvi tijekom brze replikacije virusa u akutnoj febrilnoj fazi infekcije HIV-om i lako se detektira tijekom tog razdoblja pomoću jednostavnog i relativno jeftinog ELISA testa.

Ako je zadatak identificirati sve osobe zaražene HIV-om, uključujući i one s ranim stadijima infekcije, tada je potrebno koristiti cijeli arsenal testova: na antitijela, na antigene i na RNA. Međutim, testiranje na virusnu RNK je skupo, radno intenzivno i nedostupno većini laboratorija. Ipak, oni laboratoriji koji imaju ELISA opremu mogu otkriti većinu slučajeva HIV infekcije, pod uvjetom da su uzorci testirani i na HIV protutijela i na antigen p24.

Krajem 1990-ih postojali su testni sustavi za paralelnu ELISA-u za antitijela na HIV i antigen p24, što je eliminiralo potrebu za zasebnim testovima. Razvijena je i u implementaciji je nova generacija kombiniranih test sustava za istovremeno otkrivanje protutijela na HIV i HIV antigena.

Prednost kombiniranih analiza je što oduzimaju manje vremena, zahtijevaju manje rada i isplativije su od zasebnih analiza. Kombinirani test sustavi imaju visoku analitičku osjetljivost kako zbog upotrebe sendvič ELISA testa s dva antigena za otkrivanje protutijela na HIV, tako i zbog istovremenog otkrivanja antigena p24.

Trenutno na tržištu postoji 8 kombiniranih testnih sustava četvrte generacije koji su prošli klinička ispitivanja: VIDAS HIV DUO Ultra (bioMérieux; Marcy-l'Etoile, Francuska); Enzymun-Test-HIV-Combi (Boehringer; Mannheim, Njemačka); Vironostika HIV Uni-Form II Ag/AB (Organon Teknika; Boxtel, Nizozemska); AxSYM-HIV Ag/AB (Abbott Laboratories; Abbott Park, IL, SAD); Enzygnost HIV Integral (Dade Behring; Marburg, Njemačka); Genescreen Plus HIV Ag-AB (Bio-Rad) i COBAS Core HIV Combi (Roche Diagnostics; Mannheim, Njemačka); Elecsys-HIV Combi (Boehringer; Mannheim, Njemačka). Posljednji testni sustav koristio je elektrokemiluminiscentnu sendvič metodu s dva antigena; analiza traje 18 minuta; specifičnost prema pretragama na hospitaliziranim pacijentima je 99,8%. Ovaj testni sustav omogućuje dijagnosticiranje HIV infekcije 5 dana ranije od najosjetljivijih testnih sustava za antitijela na HIV. Postoji još jedno kombinirano protutijelo bez marke i p24 ELISA sa samo 99,5% osjetljivosti i 94,8% specifičnosti.

Kombinirano testiranje na antitijela i antigene za nedavnu i dugotrajnu HIV infekciju opravdano je ne samo u testiranju darivatelja krvi, već iu mnogim kliničkim okruženjima. Rana dijagnoza HIV infekcije otkrivanjem antigena p24 omogućuje trenutno liječenje, savjetovanje bolesnika i mjere za smanjenje rizika prijenosa. Zahvaljujući sposobnosti otkrivanja antigena p24, testni sustavi četvrte generacije omogućuju dijagnosticiranje HIV infekcije na rani stadiji. Ovi setovi testova vrlo su korisni za dijagnosticiranje nedavne i dugotrajne HIV infekcije u bolnicama i neovisnim kliničkim laboratorijima i dijagnostičkim centrima (javnim i komercijalnim). Pacijenti se često obraćaju takvim ustanovama, kod kojih je rizik od HIV infekcije znatno veći nego kod darivatelja krvi. Za rano otkrivanje HIV infekcije u takvih bolesnika potrebni su testni sustavi visoke analitičke osjetljivosti.

Važno je napomenuti da visoka analitička i epidemiološka osjetljivost većine testnih sustava četvrte generacije, dokazana u testovima na pacijentima iz različitih populacija, pacijentima sa serokonverzijom i pacijentima s različitim podtipovima HIV-a, čini ove testne sustave nezamjenjivima za dijagnozu kako novijih i dugotrajne HIV infekcije u većini različite situacije. Na primjer, u kliničkim laboratorijima proračunskih zdravstvenih ustanova obično se ne provodi testiranje krvi na HIV antigene (to je prerogativ stanica za transfuziju krvi), pa se slučajevi nedavne infekcije mogu propustiti u standardnom testiranju na antitijela na HIV. . Dokazano je da otkrivanje infekcije u ranoj fazi daje temelj za pravodobno započinjanje antiretrovirusne terapije, čime se povećava njezina učinkovitost. Osim toga, postaje moguće pravodobno konzultirati pacijenta, pravilno organizirati njegovo liječenje i spriječiti prijenos HIV infekcije.

Ekspresni testovi: Ovo je klasa testnih sustava koji daju rezultate brže od 30 minuta. Brzi testovi za otkrivanje specifičnih antitijela na HIV pojavili su se krajem 1980-ih i početkom 1990-ih. stekao popularnost. Zahvaljujući poboljšanju tehnologije proizvodnje, brzi testovi postali su ništa manje precizni od ELISA (pod uvjetom da analizu pažljivo provodi kvalificirani zaposlenik). Međutim, zbog imaginarne jednostavnosti ekspresnih testova, osoblje često griješi. Na primjer, kada se dodaju reagensi, pipete se ne drže uvijek okomito (kako je navedeno u uputama), što narušava omjer volumena reagensa. Drugi izvor pogreške je sklonost mnogih tehničara da analiziraju više uzoraka u isto vrijeme. Zbog toga se vrijeme koraka analize ne održava.

Na ispravna izvedba Brzi testovi na antitijela na HIV daju pouzdane rezultate i mogu se koristiti u širokom rasponu primjena. medicinske ustanove i kliničke situacije. Konkretno, koriste se u odjelima hitne pomoći, liječničkim ordinacijama, ambulantama, odjelima patologije, mrtvačnicama, stanicama za transfuziju krvi, kao i svugdje gdje je potrebno hitno testiranje na HIV (na primjer, nakon izlaganja medicinski radnik s mogućim izvorom infekcije).

Brzi testovi na HIV neophodni su za testiranje rodilja koje nisu imale antenatalnu skrb (tj. rodilja s neodređenim HIV statusom). Dokazano je da antiretrovirusna terapija (osobito zidovudin) učinkovito smanjuje rizik od vertikalne transmisije HIV-a i da je takvo liječenje potrebno što prije za majku, a potom i za novorođenče. Brzo testiranje trudnice na HIV u prenatalnom razdoblju omogućuje, ako se otkriju antitijela, početak liječenja prije poroda.

Pravovremena dijagnoza HIV infekcije postaje izuzetno važna mjera, jer rano liječenje uvelike može odrediti daljnji razvoj bolesti i produžiti život bolesnika. NA posljednjih godina Postignut je značajan napredak u utvrđivanju ovoga strašna bolest: stari ispitni sustavi zamjenjuju se naprednijima, metode ispitivanja postaju dostupnije, a njihova točnost značajno povećana.

U ovom članku ćemo govoriti o modernim metodama dijagnoza HIV infekcije, što je korisno znati za pravovremeno liječenje ovog problema i održavanje normalne kvalitete života bolesnika.

Metode dijagnosticiranja HIV-a

U Rusiji se za dijagnozu HIV infekcije provodi standardni postupak koji uključuje dvije razine:

  • ELISA test sustav (screening analiza);
  • imunološki bloting (IB).

Mogu se koristiti i druge dijagnostičke metode:

  • ekspresni testovi.

ELISA test sustavi

U prvoj fazi dijagnoze za otkrivanje HIV infekcije koristi se test probira (ELISA) koji se temelji na proteinima HIV-a stvorenim u laboratorijima koji hvataju specifična antitijela proizvedena u tijelu kao odgovor na infekciju. Nakon njihove interakcije s reagensima (enzimima) testnog sustava dolazi do promjene boje indikatora. Dalje se te promjene boje obrađuju na posebnoj opremi, koja određuje rezultat provedene analize.

Takvi ELISA testovi mogu pokazati rezultate unutar nekoliko tjedana nakon uvođenja HIV infekcije. Ovom analizom se ne utvrđuje prisutnost virusa, već se otkriva stvaranje protutijela na njega. Ponekad u ljudskom tijelu proizvodnja antitijela na HIV počinje nakon 2 tjedna nakon infekcije, ali kod većine ljudi ona se proizvode kasnije, nakon 3-6 tjedana.

Postoje četiri generacije ELISA testova s ​​različitim osjetljivostima. Posljednjih godina sve se češće koriste testni sustavi III i IV generacije koji se temelje na sintetskim peptidima ili rekombinantnim proteinima te imaju veću specifičnost i točnost. Mogu se koristiti za dijagnosticiranje HIV infekcije, praćenje prevalencije HIV-a i osiguranje sigurnosti pri testiranju darovane krvi. Točnost III i IV generacije ELISA test sustava je 93-99% (osjetljiviji su testovi koji se proizvode u zapadnoj Europi - 99%).

Za provođenje ELISA testa pacijentu se uzima 5 ml krvi iz vene. Između posljednjeg obroka i analize treba biti najmanje 8 sati (u pravilu se provodi ujutro na prazan želudac). Takav test preporuča se uzeti najranije 3 tjedna nakon navodne infekcije (na primjer, nakon nezaštićenog odnosa s novim spolnim partnerom).

Rezultati ELISA testa dobivaju se nakon 2-10 dana:

  • negativan rezultat: ukazuje na odsutnost HIV infekcije i ne zahtijeva uputnicu stručnjaku;
  • lažno negativan rezultat: može se uočiti u ranim fazama infekcije (do 3 tjedna), sa kasne faze AIDS s teškom imunološkom supresijom i s nepravilnom pripremom krvi;
  • lažno pozitivan rezultat: može se promatrati kod nekih bolesti iu slučaju nepravilne pripreme krvi;
  • pozitivan nalaz: ukazuje na infekciju HIV infekcijom, zahtijeva IB i upućivanje bolesnika specijalistu u centar za AIDS.

Zašto ELISA test može dati lažno pozitivne rezultate?

Lažno pozitivni rezultati ELISA testa za HIV mogu se primijetiti s nepravilnom obradom krvi ili kod pacijenata s takvim stanjima i bolestima:

  • multipli mijelom;
  • zarazne bolesti izazvane virusom Epstein-Barr;
  • stanje nakon ;
  • autoimune bolesti;
  • u pozadini trudnoće;
  • stanje nakon cijepljenja.

Zbog gore opisanih razloga, u krvi mogu biti prisutna nespecifična protutijela s križnim reakcijama, čija proizvodnja nije izazvana HIV infekcijom.

Posljednjih godina značajno se smanjila učestalost lažno pozitivnih rezultata zbog korištenja test sustava III i IV generacije koji sadrže osjetljivije peptide i rekombinantne proteine ​​(sintetizirani su in vitro genetskim inženjeringom). Nakon korištenja takvih ELISA testova, učestalost lažno pozitivnih rezultata značajno se smanjila i iznosi oko 0,02-0,5%.

Lažno pozitivan rezultat ne znači da je osoba zaražena HIV-om. U takvim slučajevima WHO preporučuje drugi ELISA test (obavezna IV generacija).

Krv bolesnika šalje se u referentni ili arbitražni laboratorij s oznakom "ponoviti" i testira na ELISA test sustavu IV generacije. Ako je rezultat nove analize negativan, tada se prvi rezultat prepoznaje kao pogrešan (lažno pozitivan) i IB se ne provodi. Ako je rezultat pozitivan ili sumnjiv tijekom drugog testa, pacijent se mora podvrgnuti IB-u za 4-6 tjedana kako bi se potvrdila ili opovrgla HIV infekcija.

imunološki blotting

Konačna dijagnoza HIV infekcije može se postaviti tek nakon što se dobije pozitivan rezultat imunoblotinga (IB). Za njegovu provedbu koristi se nitrocelulozna traka na koju se nanose virusni proteini.

Vađenje krvi za IB vrši se iz vene. Zatim se podvrgava posebnoj obradi, a proteini sadržani u njegovom serumu se odvajaju u posebnom gelu prema njihovom naboju i molekularnoj težini (manipulacija se provodi na posebnoj opremi pod utjecajem električno polje). Nitrocelulozna traka se nanosi na gel krvnog seruma i upijanje („blotiranje”) se provodi u posebnoj komori. Traka se obrađuje i ako upotrijebljeni materijali sadrže antitijela na HIV, ona se vežu za antigene trake na IB i pojavljuju se kao linije.

IB se smatra pozitivnim ako:

  • prema američkim kriterijima CDC - na traci postoje dvije ili tri linije gp41, p24, gp120 / gp160;
  • prema kriterijima američke FDA - na traci su dvije linije p24, p31 i linija gp41 ili gp120 / gp160.

U 99,9% slučajeva pozitivan IB rezultat ukazuje na HIV infekciju.

U nedostatku linija - IB je negativan.

Kod identificiranja linija s gp160, gp120 i gp41, IB je dvojben. Takav se rezultat može otkriti kada:

  • onkološke bolesti;
  • trudnoća;
  • česte transfuzije krvi.

U takvim slučajevima preporuča se provesti drugu studiju pomoću pribora druge tvrtke. Ako nakon dodatnog IB-a rezultat ostane dvojben, potrebno je praćenje šest mjeseci (IB se izvodi svaka 3 mjeseca).

lančana reakcija polimeraze

PCR test može otkriti RNA virusa. Njegova osjetljivost je prilično visoka i omogućuje otkrivanje HIV infekcije već 10 dana nakon infekcije. U nekim slučajevima PCR može dati lažno pozitivne rezultate, jer njegova visoka osjetljivost također može reagirati na antitijela na druge infekcije.

Ova dijagnostička tehnika je skupa, zahtijeva posebnu opremu i visoko kvalificiran specijalisti. Ti razlozi ne dopuštaju njegovo provođenje tijekom masovnog testiranja stanovništva.

PCR se koristi u takvim slučajevima:

  • za otkrivanje HIV-a u novorođenčadi koje su rodile majke zaražene HIV-om;
  • otkrivanje HIV-a u "razdoblju prozora" ili u slučaju sumnjivog IB-a;
  • kontrolirati koncentraciju HIV-a u krvi;
  • za proučavanje krvi davatelja.

Samo PCR testom ne postavlja se dijagnoza HIV-a, već se provodi kao dodatna dijagnostička metoda za rješavanje sporova.


Ekspresne metode

Jedna od inovacija u dijagnostici HIV-a postali su brzi testovi čiji se rezultati mogu procijeniti za 10-15 minuta. Najučinkovitiji i najtočniji rezultati postižu se imunokromatografskim testovima koji se temelje na principu kapilarnog protoka. To su posebne trakice na koje se nanosi krv ili druge ispitne tekućine (slina, urin). U prisutnosti antitijela na HIV, nakon 10-15 minuta, na testu se pojavljuje obojena i kontrolna traka - pozitivan rezultat. Ako je rezultat negativan, pojavljuje se samo kontrolna crta.

Kao i kod ELISA testova, rezultate brzog testa treba potvrditi IB analizom. Tek tada se može postaviti dijagnoza HIV infekcije.

Postoje ekspresni setovi za kućno testiranje. Test OraSure Technologies1 (SAD) odobren je od FDA, dostupan je bez recepta i može se koristiti za otkrivanje HIV-a. Nakon testa, u slučaju pozitivnog rezultata, pacijentu se preporuča pregled u specijaliziranom centru za potvrdu dijagnoze.

Preostale testove za kućnu upotrebu još nije odobrila FDA i njihovi rezultati mogu biti vrlo upitni.

Unatoč činjenici da su brzi testovi inferiorni u točnosti od ELISA testova IV generacije, naširoko se koriste za dodatno testiranje stanovništva.

Možete se testirati na HIV infekciju u bilo kojoj poliklinici, Centralnoj regionalnoj bolnici ili u specijaliziranim centrima za AIDS. Na području Rusije održavaju se apsolutno povjerljivo ili anonimno. Svaki pacijent može očekivati ​​da će dobiti medicinski ili psihološko savjetovanje prije ili poslije analize. Testiranje na HIV morat ćete platiti samo u komercijalnim medicinskim ustanovama, au javnim klinikama i bolnicama obavlja se besplatno.

O tome kako se možete zaraziti HIV-om i koji mitovi postoje o mogućnostima zaraze pročitajte

Infekcija virusom humane imunodeficijencije ozbiljna je dijagnoza. Pogreške u dijagnozi mogu dovesti do katastrofalnih posljedica. ELISA analiza za HIV je najpristupačnija metoda istraživanja, ali nije informativna u svim slučajevima.

ELISA - enzimski imunološki test. Zadatak ELISA metode je otkrivanje antitijela na virus imunodeficijencije u biološkom materijalu. Koristeći metodu, moguće je pratiti prisutnost u tekućini ne samih virusa, već samo antitijela proizvedenih kao odgovor na njihovu prisutnost. ELISA se široko koristi u dijagnostici spolno prenosivih bolesti. Pomaže u prepoznavanju spolno prenosivih bolesti.

Postoji nekoliko vrsta ELISA: izravna varijanta, neizravna varijanta, sendvič metoda. U svakom slučaju, tehnika se temelji na određivanju prisutnosti protutijela, koja služe kao pokazatelj prodora stranog agensa. Kako bi se otkrili ti "žigovi", biološka se komponenta tretira enzimima.

ELISA otkriva antitijela s točnošću od 96 - 98%, pogreška je zanemariva. To je 2-4%.

ELISA - metoda za dijagnosticiranje HIV-a

ELISA analiza za HIV je prva faza dijagnoze. Antigeni virusa imunodeficijencije su proteini p24, p15, p17, p31 i glikoproteini gp 41, gp55, gp66, gp120, gp160.

Da bi se otkrio virusni protein, uzima se dio krvi iz vene. Uzorak poslan na ELISA testiranje krvi tretira se reagensima za enzimski imunološki test. Serum se izolira iz krvi. Ako se tijekom studije pronađu, tada je virus već prisutan u krvi.

Krv se daje strogo na prazan želudac. 2 dana prije analize ne preporuča se jesti masnu hranu i piti alkohol. Trebali biste prestati uzimati antivirusne lijekove unutar 14 dana.

Prednosti metode:

  • relativno niska cijena;
  • visoka stabilnost reagensa;
  • visoka osjetljivost;
  • kratko vrijeme isporuke;
  • minimalan utjecaj ljudskog faktora.

Suvremeni testni sustavi za ELISA proizvode se prema svjetskim standardima. Time se poboljšava točnost metode.

ELISA ne daje uvijek pouzdane rezultate. Nakon što virus uđe u krv, počinje latentna (skrivena) faza razvoja. Razdoblje dok se virusi nisu počeli razmnožavati, a protutijela se još nisu formirala naziva se "seronegativni prozor". Besmisleno je raditi ELISA test u ovoj fazi. Ako je došlo do infekcije, rezultat će biti . Koliko brzo se virus otkrije ovisi o tome koliko je opasnih stanica ušlo u tijelo. Uz nezaštićeni spolni odnos ili transfuziju zaražene krvi, ovo će razdoblje biti minimalno.

Za visoku pouzdanost ELISA na HIV studija provedena tri puta. Rokovi za ELISA test na virus humane imunodeficijencije:

  • 6 tjedana nakon mogućeg kontakta,
  • za 3 mjeseca,
  • šest mjeseci kasnije.

ELISA 4. generacije za HIV je najinformativnija metoda u ranim fazama infekcije. Može se provesti već 1 mjesec nakon navodne infekcije. Test je skup u usporedbi s analogom 3. generacije. Stoga se u javnim medicinskim ustanovama koristi kao dodatna dijagnostička metoda. Besplatno se provodi test 3. Ako se na temelju njegovih rezultata ne može dati jednoznačan odgovor, pacijent se šalje na ELISA 4. generacije.

Važno! Neposredno nakon infekcije, osoba postaje zarazna. Opasan je za druge, čak i kada još ne zna za svoju dijagnozu!

Ako se tijekom ELISA-e otkriju antitijela na antigene HIV-a, potrebne su dodatne studije. Spada u ove. Pouzdanost ove metode je 80%. Uz pomoć PCR-a ispituje se krv, sjeme i vaginalni iscjedak. Biološka tekućina se razdvaja u medicinskom reaktoru, zatim se podvrgava enzimskoj obradi. Kao rezultat, dobivaju se podaci o koncentraciji HIV stanica u tekućem mediju. Zbog velike pogreške (20%), uz pozitivan rezultat, dodatno se radi imunološki blotting.

Sljedeći dijagnostički korak je Combo test (ili imunološki blotting). Ovo je vrlo osjetljiva studija (pouzdanost od 98%) i treba je provesti ako su rezultati ELISA testa neuvjerljivi nakon 6 mjeseci.

Tumačenje ELISA rezultata

Vrijeme dešifriranja je od 24 do 48 sati. Ako su vam hitno potrebne informacije (obavezno kirurška intervencija), dešifriranje se provodi za 2 sata. Pokrajinske medicinske stanice nemaju uvijek potrebne reagense. Uzorak se uzima na mjestu cirkulacije, zatim se prenosi u regionalni centar. U takvim okolnostima rezultat se može saznati za 1-2 tjedna.

Rezultat enzimskog imunološkog testa može biti pozitivan ili negativan; nema drugih opcija.

Čak i ako je rezultat bio pozitivan tijekom primarne i ponovljene ELISA, pacijent se ne može prepoznati kao HIV zaražen. Moguća greška. Razlozi za lažno pozitivan rezultat:

  • kronična bolest;
  • dugotrajne zarazne bolesti;
  • trudnoća.

Stoga bi rezultat analize trebao biti razjašnjen dodatnim studijama.

Ako se tijekom imunoblotinga na HIV (reaktivno) osoba smatra HIV-inficiranom, što znači da je zdrava.

Stanice virusa s vremenom se prilagode propisanim lijekovima. Radi kontrole, ELISA test se povremeno ponavlja.

Ponekad imunobloting pokazuje lažno negativan rezultat. Izuzetno rijedak virus imunodeficijencije 6 mjeseci (ili više). To je moguće ako je mala količina virusnih stanica ušla u krvotok. Na 0,5% popusta ukupni broj slučajeva infekcija se može dijagnosticirati tek nakon godinu dana. U 99,5%, unutar šest mjeseci nakon infekcije, ELISA će dati pouzdan rezultat.

Čak i uz studije visoke preciznosti, još uvijek postoji margina pogreške od 2%. Ne treba zaboraviti ni ljudski faktor. Kako bi se uklonila mogućnost pogreške, test se može provesti u 2 različite ustanove.

Otprilike polovica svih pitanja koja se postavljaju o HIV-u vezana su uz testove na HIV i njihovu pouzdanost. Sada se posvuda kao primarni (screening) test za HIV koristi ELISA test (enzimski imunoanaliza). Njegova posebnost je u tome što ne utvrđuje prisutnost samog virusa u organizmu, već prisutnost antitijela na njega (što je, međutim, potpuni dokaz da je sam virus prisutan, čak i ako sam virus nije otkriven pomoću PCR zbog niskog virusnog opterećenja). Ali glavni problem je što se antitijela na HIV ne pojavljuju odmah nakon infekcije, već s određenim zakašnjenjem. Stoga je moguća situacija kada je već došlo do infekcije (i moguć je prijenos HIV-a na druge spolne partnere), a HIV test još uvijek ne pokazuje ništa. To se razdoblje naziva razdobljem serokonverzije, seronegativnim prozorom ili jednostavno prozorskim razdobljem. I naravno, glavno pitanje na ovu temu je koliko dugo traje taj period prozora, odnosno, koliko dugo nakon mogućeg rizika od infekcije, negativan rezultat ELISA testa može se smatrati potpuno pouzdanim.

A odgovor na to pitanje doista je vrlo važan za one koji su bili u opasnosti od zaraze, jer o tom razdoblju ovisi koliko će dugo morati čamiti u napetom iščekivanju do trenutka kada se test može napraviti.

Mora se shvatiti da ako je došlo do infekcije, tada će ELISA test to pokazati, najvjerojatnije, mnogo ispred vremena seronegativni prozor, ali ako nema infekcije, tada možete biti potpuno sigurni u to samo na temelju negativnog testa nakon završetka prozora.

Ako tražite ove informacije na webu, možete pronaći vrlo različite i proturječne podatke. Period prozora spominje se od 2 mjeseca do pola godine, godinu dana, a ponekad i više. I ovdje je poanta da se ELISA testovi koriste dugo vremena, a od tada se promijenilo nekoliko generacija. Prvi testovi bili su prilično neosjetljivi, a za njihov “rad” bila je potrebna povećana koncentracija antitijela. Odavde se razdoblje od 6 mjeseci dugo vremena pojavljivalo kao seronegativni prozor.

Trenutno su ELISA testovi četvrte generacije, ili takozvani kombinirani testovi, rašireni gotovo posvuda. Osim prisutnosti samih protutijela, utvrđuju i prisutnost specifičnog antigena p24, koji se u slučaju infekcije javlja nekoliko tjedana ranije od protutijela. To nam omogućuje da to tvrdimo da razdoblje seronegativnog prozora za moderne ELISA testove ne prelazi 3 mjeseca . Drugim riječima, negativan test napravljen 3 mjeseca nakon opasnosti od infekcije bit će potpuno pouzdan. Iako je prema postojećim statistikama tijekom prva 22 dana nakon infekcije ELISA pozitivan već u 50% svih slučajeva, a tijekom prvih 6 tjedana nakon infekcije ELISA je pozitivan već u 95%. (Izvor Current Medical Diagnosis and Treatment 2008, stranica 1162).

Stoga je optimalna shema testiranja na HIV sljedeća: 6 tjedana nakon rizika (pouzdanost negativnog testa je 95%) i ponovno, zajamčeno, 3 mjeseca nakon rizika (pouzdanost je gotovo 100%).

Postoje podaci da nakon razdoblja akutne faze HIV antigen p24 može nestati. Ali morate shvatiti da ako se to dogodi, tada su do tog vremena već razvijena antitijela na HIV i stoga će ELISA test u svakom slučaju biti pozitivan i pouzdan.

Zašto se onda na webu, telefonskim linijama za pomoć i drugim izvorima još uvijek tako često pojavljuje razdoblje od 6 mjeseci? Jedan od razloga su jednostavno zastarjeli podaci koji su se odnosili na ranije generacije ELISA testova. Druga stvar, možda, je da, koliko ja znam, period od 6 mjeseci još uvijek postoji u službenim preporukama za liječnike. Stoga se tijekom službenih konzultacija, najčešće radi reosiguranja i formalne usklađenosti s tim preporukama, govori o vremenskom razdoblju od 6 mjeseci, prisiljavajući ljude da čekaju i pate pola godine, umjesto 3 mjeseca.

Produljenje razdoblja serokonverzije moguće je samo u nekim iznimnim i stoga vrlo rijetkim slučajevima: ako osoba uzima postekspozicijsku profilaksu protiv HIV-a ili imunosupresive - imunosupresive (nikakvi drugi lijekovi ne mogu utjecati na razdoblje serokonverzije), ili u slučaju teške bolesti imunološkog sustava (nikakve druge bolesti također ne utječu na veličinu prozora). Ali, u potonjem slučaju, jednostavno je nemoguće ne znati za svoju bolest, jer. ne može proći bez ozbiljnih posljedica. Informacija da uporaba droga može utjecati na razdoblje prozora nije istinita.

Da na kraju zatvorim temu ELISA testova, želim dodati da iz niza razloga (trudnoća, određene bolesti itd.) ovaj test može dati lažno pozitivan rezultat (u oko 1% slučajeva). Stoga se svaki pozitivan ELISA test uvijek ponovno provjerava na osjetljivijem i specifičnijem testu - imunoblotu. Pozitivan imunoblot rezultat nakon pozitivnog ELISA testa je 99,9% pouzdan - ovo je najveća točnost za bilo koji medicinski test. I tek nakon takve potvrde postavlja se dijagnoza. HIV infekcija". Ako je imunoblot negativan, tada je prvi test bio lažno pozitivan, a osoba zapravo nema HIV.

Dakle, za sve koji će se testirati na HIV, ponovit ću još jednom glavnu tezu ovog posta: konačna pouzdanost HIV testa traje 3 mjeseca nakon moguće infekcije. Iako će u većini slučajeva, ako do infekcije ipak dođe, ELISA test postati pozitivan puno prije kraja tog razdoblja.

UpDt: Da ne budem neutemeljen, navodim kao primjer prijevod izvatka iz francuskih preporuka za testiranje na HIV (http://www.has-sante.fr): „U slučaju mogućeg rizika od infekcije HIV-om koji se dogodio manje od 3 mjeseca prije testiranja, preporučena strategija testiranja je otkrivanje antitijela na HIV... 3 mjeseca nakon mogućeg rizika ili 3 mjeseca nakon završetka profilaktičke terapije.... Testiranje na antitijela 6 mjeseci nakon sumnje na rizik ili kraj profilaktičke terapije, koja je bila obavezna, prema naredbi Ministarstva zdravstva Republike Francuske od 18. siječnja 1993., poništena prema naredbi Ministarstva zdravstva od 1. kolovoza 2007.

Proučavanje uzoraka krvi pomoću ELISA testa za HIV infekciju jedna je od najranijih i najpouzdanijih dijagnostičkih metoda. Enzimski imunološki test jedna je od rijetkih studija uz PCR koja s visokim stupnjem vjerojatnosti potvrđuje ili opovrgava tako strašnu dijagnozu kao što je HIV infekcija ili AIDS. Od otkrića prvih slučajeva zaraze virusom imunodeficijencije u Sovjetskom Savezu, a to je 1983. Lijek koji bi u potpunosti izliječio ovu infekciju, kao ni cjepivo za nju, nije izumljen, ali je ovaj proces u aktivnom razvoju. U međuvremenu, samo rana dijagnoza HIV infekcije omogućuje vam da patološki proces držite pod kontrolom.

Informativni izlet o HIV infekciji

Virus humane imunodeficijencije je retrovirus koji uzrokuje spor tijek bolesti. Prodirući u tijelo, virus imunodeficijencije prvenstveno utječe na limfno tkivo. Zdrav imunitet proizvodi T-limfocite kako bi prepoznao novopridošli virusni uzročnik. Zatim dati informaciju antitijelima, po kojim znakovima prepoznati virus imunodeficijencije i uništiti ga. Proces "prepoznavanja" virusa imunodeficijencije odvija se uz pomoć CD4 receptorskih proteina. Ali upravo u ovoj fazi opaža se nešto čudno, nešto što nam dugi niz godina ne dopušta da pobijedimo kugu 20. stoljeća.

Imunološka stanica CD4 dolazi u kontakt s virusom imunodeficijencije kako bi prepoznala stranog agensa. U ovom se trenutku virus imunodeficijencije pričvršćuje na membranu limfocita, spaja se s receptorskom ljuskom i uvodi kapsulu sa svojom u stanicu imuniteta. genetske informacije i specifične virusne proteine. I stanica, poslana na izračun virusa imunodeficijencije, od sada sama postaje zaražena. Ali sve se događa, nažalost, ne s jednom stanicom, već u vrlo velikoj mjeri. Imunološki sustav osoba, kao odgovor na već “bivše vlastite”, a sada zaražene stanice, stvara nova antitijela. Ali virusi imunodeficijencije, prema ranije opisanoj shemi, uvijek iznova hvataju obrambene stanice.

Dakle, ljudski imunitet pada u začarani krug. Jedini način da se pomogne tijelu je provođenje visoko aktivne antiretrovirusne infekcije (HAART). I također ići na punu Zdrav stil životaživota i prehrane, što će osloboditi velike resurse imuniteta od nepotrebnog rada. Znanstvenici diljem svijeta udružili su snage i neprestano provode istraživanja u potrazi za učinkovitim lijekom za HIV infekciju.

Ne tako davno proveden je eksperiment s proteinom CCR5 koji osigurava urođenu otpornost organizma određenog dijela ljudi na HIV infekciju. Znanstvenici su podvrgli krvnu tvar ljudskih dobrovoljaca genskoj terapiji kako bi uveli CCR5 u T-pomoćne stanice. Kod svih pacijenata to je dovelo do velikog smanjenja broja retrovirusne DNA. A kod jednog pacijenta ovom je metodom virus imunodeficijencije potpuno eliminiran. Na temelju ovog eksperimenta još uvijek se samo u jednom slučaju može pretpostaviti uspješnu pobjedu nad strašnom kugom 20. stoljeća.

Od 2016. ova je aktivnost značajno napredovala. Dobiveni su zapanjujući rezultati devedeset postotnog uništenja virusa imunodeficijencije uz pomoć napadačkih protutijela koja luči mišićno tkivo, zaobilazeći zarobljenu imunost. Da bi se to postiglo, u mišićno tkivo eksperimentalnih živih bića usađen je poseban gen koji proizvodi te iste stanice ubojice za uništavanje HIV infekcije. Ali ova metoda još nije korištena kod ljudi, iako se planira u narednim godinama.

Štoviše, nema smisla klonuti duhom. I bolje je identificirati virus imunodeficijencije što je ranije moguće, što se može učiniti uz pomoć ELISA-e ako postoji rizik od infekcije. A ako se dijagnoza potvrdi, održavajte svoj imunitet HAART-om dok se ne objavi novi lijek za HIV infekciju.

Dijagnoza HIV infekcije

ELISA metoda za HIV infekciju usmjerena je na otkrivanje antitijela na virus imunodeficijencije u uzorku ljudske krvi. Jednom kada uđu u tijelo, retrovirusi, uključujući HIV infekciju, ne počinju odmah aktivno hvatati CD4 imunološke stanice (T-limfocite). Ali ne biste trebali čekati dok agresivni agensi ne započnu smrtonosnu aktivnost u tijelu. Nije tajna da za bilo koju bolest, a HIV infekcija nije iznimka, što se ranije počne s terapijom, to je liječenje učinkovitije.

Kada je u pitanju virus humane imunodeficijencije, službeno nisu zabilježeni slučajevi potpunog izlječenja. Ali to uopće ne znači da trebate odustati i pustiti bolest da ide svojim tokom. Osobe s HIV infekcijom žive do 75-80 godina, pod uvjetom da su otkrivene u početnoj fazi i da su na stalnoj terapiji održavanja.

Metoda enzimskog imunološkog testa za dijagnozu HIV infekcije ima visoku pouzdanost od oko 97-99%. Ali upravo taj mali dio od 1–3% može dati lažno pozitivan ili lažno negativan rezultat u dijagnozi HIV infekcije pomoću ELISA testa. U te svrhe, kako bi se konačno potvrdile ili opovrgle indikacije enzimskog imunološkog testa, koristi se analiza koja se naziva imunoblot (IB).

Što su ELISA i IB metode za HIV infekciju

Enzimski imunološki test za HIV infekciju 4. generacije usmjeren je ne samo na traženje i identifikaciju patogenih stanica, već i na određivanje njihovog broja. Stoga, jedan enzimski imunološki test kombinira i kvalitativno i kvantitativno testiranje. ELISA metoda 4. generacije za HIV infekciju u razdoblju od šest tjedana od trenutka pretpostavljene infekcije pokazat će 100% visoku pouzdanost rezultata.

Enzimski imunološki test temelji se na interakciji specifičnih protutijela i srodnih antigena. Zahvaljujući posebnom enzimu nastaje kombinacija "antigen-antitijelo". Za izvođenje ove reakcije za detekciju imunoglobulina na HIV infekciju, uzorak krvi se stavlja u polistirensku ploču s 96 jažica, u kojima su rekombinantni proteini u čvrstom obliku (sorbirani). Antigeni ili antitijela koja se nalaze u posudi s krvnim serumom prepoznaju njima poznati objekt i s njim tvore spoj “AT-AG”. Za utvrđivanje protutijela na viruse imunodeficijencije tipa 1 i 2 također se koristi DS IFF test za HIV AG-AT.

Prednosti ELISA metode za HIV infekciju 4. generacije:

  • Visoka pouzdanost, preko 96%. Lažni rezultati češće nisu uzrokovani samom analizom, već nepravilnom pripremom ili nedavnom respiratornom bolešću.
  • Određivanje prisutnosti i količine imunoglobulina.
  • Mogućnost praćenja rezultata HIV terapije.
  • Brzina dobivanja rezultata HIV testa, koja je nekoliko sati, ako se provodi u dijagnostičkom centru.
  • Analiza na HIV infekciju četiri, čija je imunoenzimska reaktivnost značajno veća od svojih prethodnika, informativna je tijekom serološkog prozora virusa imunodeficijencije.

Imunobloting je probir i provodi se za određivanje vrste antigena. IB studija probira koristi se kao verifikacijski test za HIV infekciju 5-7 tjedana nakon ELISA testa. IB metoda temelji se na korištenju elektroforeze za odvajanje antigena virusa imunodeficijencije. Proces odvajanja antigena omogućuje otkrivanje specifičnih imunoglobulina za svaki specifičan antigen HIV infekcije.

Imunobloting se koristi kada enzimski imunološki test za HIV infekciju dvaput zaredom pokaže lažno pozitivan ili lažno negativan rezultat. Sumnja se može pojaviti u odsutnosti ili, obrnuto, prisutnosti karakterističnih simptoma HIV infekcije. Iako i ovdje mogu postojati razne varijacije.

Tumačenje ELISA rezultata za HIV infekciju

U slučaju kada se ELISA plus IB probirom potvrdi kao pozitivan, nema sumnje da pacijent ima virus imunodeficijencije u organizmu. Ali ako je, na primjer, IFF pozitivan na HIV, a imunoblot je negativan, onda zaključuju da je infekcija "minus", odnosno da je nema.

Samo u takvoj situaciji pacijent se ipak šalje na dodatni pregled kako bi se sigurno isključio virus imunodeficijencije.

A s imunoenzimskim testom za HIV 4. generacije "minus" i pozitivnim imunoblotingom, moguće je da je u tijelu prisutna još jedna infekcija. Možda ih osoba ima autoimuna bolest, onkološki proces, ponekad psorijaza kože ili zglobova daje lažno pozitivne rezultate i ELISA i IB.

Druga opcija, kada imunoenzimski test za HIV infekciju pokazuje "minus" rezultat i imunoblot također s "minus" vrijednošću, ovdje se možete samo radovati zbog odsutnosti virusa imunodeficijencije. Ali ako postoje specifični znakovi svojstveni HIV infekciji ili ako je osoba u bliskom kontaktu s HIV pozitivnim pacijentom. Tada će također biti potrebno provesti dodatnu dijagnostiku, na primjer, lančanu reakciju polimeraze (PCR). Osim toga, uz sumnjive pokazatelje "minus" ili "plus", pacijentu se preporučuje ponovno uzimanje krvi nakon 4, a po mogućnosti 6 mjeseci.

Norma i odstupanje broja T-limfocita kod HIV infekcije:

  • Norma T-stanica je od 1000 do 2900 µl.
  • AIDS rani 500 do 200 µl.
  • AIDS u kasnoj fazi manje od 200 µl.

Bolest je lakše spriječiti nego liječiti - to je svima dobro poznata mudrost. Od širenja slobodnog morala u društvu pojavio se veliki broj raznih spolnih bolesti. HIV infekcije i AIDS još uvijek se svrstavaju u neizlječive bolesti. Način prijenosa je uglavnom spolni i putem krvi. Nemoguće je zaštititi se sto posto od jedne bolesti. Postoje mnoge nepredviđene situacije, čak i za ljude koji vode moralan i čist način života. U situaciji povećanog rizika od zaraze HIV-om i drugim opasnim infekcijama krvna dijagnostika je neprocjenjiva.

U kontaktu s